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基于MAIDLI生物质谱的蛋白质分析服务

◆仪器原理
      MALDI-TOF-TOF-TOF-MS(基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱, 英文名Matrix-Assisted Laser Desorption/ Ionization Tandem Time of Flight Mass Spectrometry)是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱,其无论是在理论上还是在设计上都是十分简单和高效的。仪器主要由两部分组成:基质附助激光解吸电离离子源(MALDI)和飞行时间质量分析器(TOF)。MALDI的原理是用激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜,基质从激光中吸收能量传递给生物分子,而电离过程中将质子转移到生物分子或从生物分子得到质子,而使生物分子电离的过程。因此它是一种软电离技术,适用于混合物及生物大分子的测定。TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道,根据到达检测器的飞行时间不同而被检测即测定离子的质荷比(M/Z)与离子的飞行时间成正比 ,检测离子。MALDI-TOF-MS具有灵敏度高、准确度高及分辨率高等特点,为生命科学等领域提供了一种强有力的分析测试手段,并正扮演着越来越重要的作用。
◆服务项目:
      双向电泳胶点样品的高成功率的蛋白质鉴定:4700 TOF/TOF质谱仪可用于肽指纹谱鉴定,肽序列测定和翻译后修饰(PTM)的检测和分析。本序列产品可用于高通量,高灵敏度的蛋白质鉴定工作。使用本仪器,可以在进行MALDI-TOF肽指纹谱鉴定之后,在同一点好的样品上立即使用MALDI-TOF/TOF技术而获得更为详尽的蛋白质鉴定结果。在短短数秒之内即可由极少量的样品获得完整的MS/MS数据。


      从头测序:4700 TOF/TOF质谱仪可以提供两种从头测序方法:1.为了达到最高的特异性,所获得的谱图可方便清晰地辨认出b或者y离子。2.为了获得对所选多肽的深度分析,亦可采用高能量碰撞诱导解离(CID)技术。

      通过LC-MALDI方法对蛋白进行鉴定和定量分析:LC-MALDI提供了一条独特而又聪明的WARP-LC技术路线。通过这一技术路线,低丰度蛋白质可在MALDI-TOF/TOF技术下有效地被鉴定和表征。这一技术路线还可以通过和LC-ESI-MS/MS数据的结合而得到进一步地增强。二者结合所产生的LC-ESI-MALDI-MS/MS技术路线充分利用了这两种不同离子化方法在同一实验中所带来的互补信息,提供了全新水平的认识。运用各种同位素标记技术(如ICPL,ICATTM,和iTRAQ)的定量表达蛋白质组学实验也可实现。

蛋白质的磷酸化分析

蛋白质的分子量测定

糖蛋白,糖肽,多糖的分析